Metodos De Sintetizacion De Polipetidos Heteromultimericos En Levadura Utilizando Una Estrategia De Apareamiento Haploide.

Resumen de la Invención

La presente invención se refiere a un contenedor de almacenamiento de revelador y un aparato formador de imágenes que incluye dicho contenedor. En particular, la invención se refiere a un contenedor de almacenamiento de revelador que es capaz de mantener la calidad del revelador durante largos períodos de tiempo y evitar la contaminación del mismo.

El contenedor de almacenamiento de revelador de la presente invención comprende una cámara de almacenamiento que contiene el revelador, una tapa de cierre hermético para cerrar la cámara de almacenamiento y una unidad de desgasificación. La unidad de desgasificación se encuentra instalada en la tapa de cierre hermético y se encarga de eliminar el aire y los gases disueltos en el revelador. De esta manera, se evita la oxidación del revelador y se garantiza su calidad durante largos períodos de tiempo.

Además, el contenedor de almacenamiento de revelador de la presente invención incluye una unidad de recirculación de revelador. La unidad de recirculación de revelador se encarga de mantener el revelador en movimiento constante para evitar la sedimentación de los componentes del mismo y garantizar su homogeneidad. La unidad de recirculación de revelador se encuentra conectada a una bomba de recirculación que se encarga de hacer circular el revelador a través de un circuito cerrado que incluye la cámara de almacenamiento y la unidad de desgasificación.

El aparato formador de imágenes que incluye el contenedor de almacenamiento de revelador de la presente invención se compone de una unidad de revelado y una unidad de fijado. La unidad de revelado se encarga de aplicar el revelador sobre la superficie del material fotosensible para formar la imagen. La unidad de fijado se encarga de fijar la imagen formada en el material fotosensible mediante la aplicación de un agente fijador.

En conclusión, el contenedor de almacenamiento de revelador y el aparato formador de imágenes de la presente invención ofrecen una solución efectiva para el almacenamiento del revelador y la formación de imágenes. La unidad de desgasificación y la unidad de recirculación de revelador garantizan la calidad del revelador durante largos períodos de tiempo, mientras que la unidad de revelado y la unidad de fijado garantizan la formación y fijación efectiva de las imágenes.

Descripción Técnica Detallada (Abstract de Base de Datos)

La presente invencion se refiere a metodos para la sintesis y secrecion de proteinas hetero-multimericas recombinantes en levaduras competentes en el apareamiento. Un primer vector de expresion es transformado en una primera celula haploide; y un segundo vector de expresion es transformado en una segunda celula haploide. Las celulas haploides transformadas, cada una que sintetiza individualmente un polipeptido no identico, son identificadas y luego cruzadas o fusionadas geneticamente. Las cepas diploides resultantes son utilizadas para producir y secretar la proteina hetero-multimerica biologicamente funcional y ensamblada totalmente.

Detalles de la Patente

Figura Jurídica:

Patentes de Invencion

Número de Solicitud:

PA/a/2006/004334

Fecha de Presentación:

19-04-2006

Clasificación:

C12P21/04 (2006-01), C07K16/00 (2006-01), C07K16/28 (2006-01), C12N15/74 (2006-01), C12N15/81 (2006-01)

Solicitante(s):

Inventor(es):

JAMES M. CREGG, JOHN LATHAM, MARK LITTON, RANDALL SCHATZMAN, ILYA I. TOLSTORUKOV, 535 Watson Drive, 91711, Claremont, California, E.U.A.

Información Adicional

La síntesis de polipéptidos heteromultiméricos en levadura es un proceso crucial en la producción de proteínas recombinantes para diversos fines, desde la investigación hasta la producción industrial de medicamentos y otros productos biotecnológicos. En este sentido, la estrategia de apareamiento haploide ha demostrado ser una herramienta eficaz para la síntesis de polipéptidos heteromultiméricos en levadura. Los métodos de síntesis de polipéptidos heteromultiméricos en levadura utilizando una estrategia de apareamiento haploide se basan en la fusión de dos células haploides, cada una portadora de un vector de expresión que codifica una subunidad diferente del polipéptido heteromultimérico. Las células fusionadas luego se cultivan en un medio selectivo que permite la selección de células que han integrado ambos vectores de expresión y, por lo tanto, son capaces de sintetizar el polipéptido heteromultimérico completo. Uno de los métodos más utilizados es el sistema de apareamiento haploide de levadura Pichia pastoris. Este sistema se basa en la fusión de dos células haploides de Pichia pastoris, cada una portadora de un vector de expresión que codifica una subunidad diferente del polipéptido heteromultimérico. Las células fusionadas se cultivan en un medio selectivo que permite la selección de células que han integrado ambos vectores de expresión y, por lo tanto, son capaces de sintetizar el polipéptido heteromultimérico completo. Otro método es el sistema de apareamiento haploide de levadura Saccharomyces cerevisiae. En este sistema, las células haploides portadoras de los vectores de expresión se fusionan utilizando un tratamiento con polietilenglicol y se cultivan en un medio selectivo que permite la selección de células que han integrado ambos vectores de expresión y, por lo tanto, son capaces de sintetizar el polipéptido heteromultimérico completo. En conclusión, los métodos de síntesis de polipéptidos heteromultiméricos en levadura utilizando una estrategia de apareamiento haploide son una herramienta valiosa en la producción de proteínas recombinantes. Estos métodos permiten la síntesis eficiente de polipéptidos heteromultiméricos completos a partir de células haploides portadoras de vectores de expresión que codifican subunidades diferentes del polipéptido. La aplicación de estos métodos en la producción de proteínas recombinantes tiene un gran potencial en la industria biotecnológica.

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